多聚赖氨酸包被培养皿

生活 3天前 8次浏览

聚-D-赖氨酸(PDL)和聚-L-赖氨酸(PLL)是合成的化合物,通过改变培养基上的表面电荷来增强细胞粘附性和蛋白质吸收。除了促进细胞粘附外,聚赖氨酸表面处理还能支持神经元外植,提高许多中枢神经系统(CNS)原代细胞的培养存活率。由于PDL和PLL是人工合成的分子,所以不会刺激在其上培养的细胞的生物活性,也不会引入天然聚合物所携带的杂质。

多聚赖氨酸包被培养皿

应用范围包括:

  • 各种细胞类型的附着和扩散。
  • 细胞分化和神经元生长
  • 快速转染细胞系的附着力
  • 支持初级神经元的培养存活
  • 无血清或还原血清培养

资料来源:

  • 合成PDL(MW 75-150 kD)
  • 合成PLL(MW 30-70 kD)

质量控制:

  • 测试促进RCG细胞牢固附着的能力。
  • 经检测,细菌和真菌含量为阴性

存储:

  • 4℃至30℃的干燥条件下。

我要培养原代神经细胞培养,要用多聚赖氨酸铺细胞培养板,请问赖氨酸液怎么配,怎样铺扳子?

答:配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸,如是25mg,就需要250ml三蒸水,用移液管将 少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中,然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中,(已置烧杯中)。最后加三蒸水达250ml,过滤除菌分装与小瓶中即可。保存于-20度,近期用的话可放于4度冰箱内保存。 注意每一小瓶的量不要太满,若20ml的瓶子,只装15ml可,若太满,放于-2度有可能会将瓶子弄碎,因冻后体积增加。(我就有这个教训) 另外烧杯,小瓶、移液管都要灭菌处理的,泡酸高压什么的。我们用的是一种用注射器过滤的过滤器,一次性的。一个能最多有效 过滤200ml。

铺板的操作:首先要在消毒实验室,包括超净台,紫外消度20-30分钟。消毒后30分钟进入实验室。事先准备100ml三蒸水,经高压灭菌处理。具体细节就不多说了。

首先打开板子,用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中,大概每孔3-4滴吧。将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。

取出板子,用吸管将多聚赖氨酸吸出。换吸管,加入三蒸水,冲洗三次,即将每孔内加入三蒸水,没过底,多点也行。再将水吸出来。反复三次。注意换吸管,要无菌操作的。

最后将铺好的板子放于培养箱待用。

如果你做免疫组化,需要放小的玻片到孔内,就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。


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